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 乙肝表面抗原（HBsAg）血清檢測是獻血者和肝炎病人乙肝病毒感染的重要依據(jù) ， 由于ELISA法監(jiān)測簡單、快速、成本低且具有較好的特異性和較高的靈敏度，特別適合大批獻血員的篩查，已經(jīng)成為血站和臨床的主要檢驗方法。
由于不同生產(chǎn)廠家生產(chǎn)ELISA試劑盒的方法不同，導(dǎo)致靈敏度也不相同。為了深入了解血液HBsAg ELISA篩查陽性樣本確證結(jié)果，分別采用進口和國產(chǎn)ELISA試劑盒進行血液篩查，中和實驗及分子生物學(xué)PCR方法對陽性結(jié)果進行確證分析，對15400例無償獻血者進行國產(chǎn)和進口試劑篩查，155例陽性結(jié)果進行多方法確證分析，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 材料與方法
1.1 對象
收集深圳市無償獻血者樣本共15400例。所有樣本均經(jīng)乙肝金標(biāo)試紙條篩查合格。
1.2 檢查項目及標(biāo)準
血液篩查按衛(wèi)生部《獻血者健康檢查標(biāo)準》。HBsAg中和實驗中和率>50%為確證陽性。
1.3 方法
HBsAg篩查兩遍均采用ELISA法，確證實驗為中和實驗，對ELISA陽性而中和實驗陰性樣本應(yīng)用PCR法復(fù)證。
1.4 試劑
HBsAg初篩為國產(chǎn)試劑，復(fù)查為進口試劑，HBˉsAg中和試劑為美國諾泰公司產(chǎn)品。定性PCR采用美國諾泰公司和上海伊麗薩生物科技。
1.5 儀器
瑞士TECAN RSP-200及瑞士MICRO STAR全自動加樣儀，Microlab FAME和德國DADE Behring全自動酶免分析儀。德國ROCHE COBAS PCR分析儀和PE5700核酸擴增儀。

2 結(jié)果
2.1 以衛(wèi)生部臨床檢驗中心的1ng/ml HBsAg質(zhì)控血清，用正常血清稀釋隨標(biāo)本檢測，國產(chǎn)ELISA試劑盒檢測靈敏度為0.5ng/ml，進口ELISA試劑盒為0.10ng/ml。用中和實驗對稀釋0.1ng/ml HBsAg質(zhì)控血清進行10批次檢測，均成陽性結(jié)果。
2.2 對15400人份血樣用國產(chǎn)和進口ELISA試劑盒檢出HBˉsAg陽性樣本155份（占總數(shù)0.99%），經(jīng)中和實驗確證陽性122例，HBsAg真陽性檢出率為0.79%，對單進口或國產(chǎn)試劑陽性而中和實驗確證陰性的標(biāo)本用PCR定性實驗檢測DNA復(fù)證， 33例（占總數(shù)0.21%）中和實驗和PCR結(jié)果均為陰性，提示ELISA結(jié)果可能為假陽性。

2.3 確證實驗陽性的122份樣本S/CO值
其中進口試劑S/CO值分布以>3為大多數(shù)，占91.7%，表 明進口ELISA試劑盒靈敏度高，不易漏檢。國產(chǎn)ELISA試劑盒S/CO值分布以1～10之間為多數(shù)占65.5%，而1～0.7區(qū)間有11例，占9%，表明試劑靈敏度欠佳。

3 討論
由于兩種試劑靈敏度不同，其結(jié)果差異較大。在155例ELISA陽性樣本中，共122例確證陽性，其中國產(chǎn)試劑檢出88例，檢出率為72.1%，進口試劑全部檢出，兩者差異有顯著性（X 2 =17.1，P<0.05）。在進口試劑單陽性結(jié)果40例中，經(jīng)確認34例為陽性，國產(chǎn)試劑未檢出，國產(chǎn)試劑存在一定的漏檢率。主要由于0.5～0.1ng/ml的HBV不能檢出的原因。在33例ELISA陽性確證實驗陰性樣本中，進口試劑占6例，為18.2%，國產(chǎn)試劑27例，占71.8%，進口試劑假陽性率明顯比國產(chǎn)試劑低。為減少輸血后乙肝感染，在復(fù)檢時采用高靈敏度特異性較好的進口ELISA試劑盒是很有必要的。
由于中和實驗具有特異性高，可操作性強，在對乙肝病毒DNA檢測條件要求很高的情況下，運用中和實驗進行ELISA陽性結(jié)果的確定分析，具有很高的實用價值。